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NanoDrop 2000分光光度計(jì)組成結(jié)構(gòu)以及使用方法
點(diǎn)擊次數(shù):2335 更新時(shí)間:2018-10-29
   NanoDrop 2000分光光度計(jì)是有哪幾個(gè)部分組成的?
 
  紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是有哪幾個(gè)部分組成的?是很多朋友們想要知道的,業(yè)內(nèi)相關(guān)專家介紹,這種設(shè)備往往是有光學(xué)系統(tǒng)、電光系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)和輸出打印系統(tǒng)等部分組成。
 
  光學(xué)系統(tǒng):紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)這種部分系統(tǒng)又包括外光路系統(tǒng)和單色器兩個(gè)主要部分,其中外光路和單色器各有很多類型,單色器就是這種設(shè)備用于散光的主要來(lái)源,也是整機(jī)在使用時(shí)候主要分析誤差的來(lái)源之一。
 
  電光系統(tǒng):這種部分又包括鎢燈和相應(yīng)的電源組成,在該設(shè)備中對(duì)整體的穩(wěn)定性會(huì)有很大影響的,這種設(shè)備也是儀器不穩(wěn)定的主要原因之一。
 
  光電系統(tǒng):這種部分就是能夠?qū)⒐庑盘?hào)變?yōu)殡娦盘?hào)的關(guān)鍵部件,不但會(huì)直接影響到儀器的靈敏度和適用范圍,而且也有光電管、光電倍增管、硅光電池和二級(jí)管陣列等。
 
  電子系統(tǒng):這種部分主要有放大器、A/D變換器等組成,其中放大器就是影響整機(jī)靈敏度和穩(wěn)定性的主要部件,當(dāng)然了這種部件還是噪聲的主要來(lái)源,會(huì)直接影響到紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)設(shè)備的分析誤差。
 
  NanoDrop 2000分光光度計(jì)原理 :
 
  分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
 
  根據(jù)Lambert-Beer定律:A=εbc,(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),為液池厚度,c為溶液濃度)可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
 
  你可以用紫外NanoDrop 2000分光光度計(jì)測(cè)定定三種農(nóng)藥的波長(zhǎng)在某溶液中的大、小吸收波長(zhǎng)。
 
  配制溶液-在光譜檢測(cè)項(xiàng)下進(jìn)行-調(diào)整檢測(cè)光譜范圍及速度--掃描光譜圖--吸光度大處對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)為吸收波長(zhǎng),吸光度小處對(duì)應(yīng)的波長(zhǎng)為小吸收波長(zhǎng)。
 
  NanoDrop 2000分光光度計(jì)種類繁多,但不外乎簡(jiǎn)易型、中檔型和型三大類。我們?cè)谶x用分光光度計(jì)時(shí)需要考慮以下幾個(gè)方面:
 
  1.波長(zhǎng)檢測(cè)范圍,波長(zhǎng)選擇方式:越的儀器波長(zhǎng)檢測(cè)范圍越寬,當(dāng)然價(jià)格也較高,用戶需要根據(jù)自己的需求選擇合適的波長(zhǎng)范圍;對(duì)于簡(jiǎn)單型的儀器,波長(zhǎng)選擇方式一般是手動(dòng)查找,這種方式的重復(fù)性較差,型的儀器中波長(zhǎng)可以按照設(shè)定模式自動(dòng)查找或掃描,其次型的波長(zhǎng)掃描速度的檔位也會(huì)增加。
 
  2.光束:光束類型分為單光束型,雙光束型或準(zhǔn)雙光束型。單光束一般適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度,不能作全波段光譜掃描,并且要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性;雙光束可以自動(dòng)記錄,快速全波段掃描??上庠床环€(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析;假雙光束也就是比例雙光束,優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達(dá)檢測(cè)器,另一束通過(guò)樣品后到達(dá)另一個(gè)檢測(cè)器。但是這種方式并不能消除參比造成的影響。
 
  3.光源:可見(jiàn)光區(qū)主要用鎢燈,鹵鎢(320~2500nm);紫外區(qū)主要用氫燈,氘燈(180~375nm);氙燈在紫外和可見(jiàn)光區(qū)均可用作光源。
 
  4.樣品支架:簡(jiǎn)單的樣品支架為推拉式四聯(lián)池架,一次只能測(cè)量一個(gè)樣品,參比和樣品分兩次測(cè)量;型的樣品池支架為兩個(gè)固定式,分別是樣品通道和參比通道,可以同時(shí)測(cè)量參比和樣品的吸光值。
 
  5.狹縫:簡(jiǎn)易型的狹縫一般是固定寬度模式,狹縫寬度多數(shù)為2nm,也有1.5nm的;型的儀器狹縫均為連續(xù)可調(diào)型,可以適應(yīng)高分辨率的需要。
 
  6.光學(xué)性能指標(biāo):光學(xué)性能的高低直接影響到測(cè)量的準(zhǔn)確性,其中光柵的技術(shù)指標(biāo)尤為重要。型儀器的光柵質(zhì)量較好,一般的光柵為凹面型,并且大尺寸的凹面光柵對(duì)應(yīng)的刻槽數(shù)越多,因此在分辨率和雜散光方面指標(biāo)要優(yōu)于簡(jiǎn)易型儀器。
 
  7.檢測(cè)器:檢測(cè)器是利用光電效應(yīng),將透過(guò)溶液的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),并將電信號(hào)放大的裝置。簡(jiǎn)易型儀器一般采用光敏二極管;中檔型儀器采用硅光二極管;型儀器的檢測(cè)器使用高靈敏度的光電倍增管和紅外檢測(cè)器。
 
  8.顯示器:簡(jiǎn)易型儀器多為機(jī)械表頭或數(shù)碼管顯示器,沒(méi)有數(shù)據(jù)處理器;型儀器的顯示器為液晶式或連接電腦,數(shù)據(jù)處理可由儀器自身具有的或外接計(jì)算機(jī)處理。
 
  9.測(cè)量模式:NanoDrop 2000分光光度計(jì)多為定點(diǎn)(固定波長(zhǎng))吸光度或透過(guò)率測(cè)量方式,基本不能進(jìn)行波長(zhǎng)掃描測(cè)量;型儀器的測(cè)量模式較多,可以顯示透過(guò)率、吸光度、濃度直接讀數(shù)、單光束,單點(diǎn)及掃描均可。
 
  10.測(cè)量附件:衡量?jī)x器質(zhì)量高低的重要方面是看儀器是否具有豐富的附屬測(cè)量器件,如偏振附件、積分球附件、反射附件、自動(dòng)進(jìn)樣器附件、色度分析軟件、薄膜附件。
 
  11.測(cè)量樣品的狀態(tài):可見(jiàn)和NanoDrop 2000分光光度計(jì)一般測(cè)量液態(tài)樣品,紅外分光光度計(jì)一般能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。