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本文嘗試從用戶實(shí)際使用的角度,探討應(yīng)該如何看待花樣繁多的參數(shù)特性,希望能幫助大家找到真正合適自己的ELX800 酶標(biāo)儀。
一、濾片Vs光柵
ELX800 酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。當(dāng)然也有一些型號,例如Synergy4和EnVision等,一臺(tái)機(jī)器里面同時(shí)裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時(shí)完成同一個(gè)檢測,還是想用光柵的時(shí)候用光柵,該用濾片的時(shí)候用濾片;還有一些實(shí)驗(yàn)非用其中一個(gè)不可,另一模塊實(shí)現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
總體來說,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實(shí)也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實(shí)現(xiàn)大部分實(shí)驗(yàn)的需要。目前常規(guī)ELX800 酶標(biāo)儀中高的檢測靈敏度就是用濾光片型做出來的,例如TECANInfiniteF500的熒光檢測的靈敏度可以達(dá)到0.04fmol/孔(熒光素,384孔/80ul)。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實(shí)驗(yàn)類型的檢測需要,而且有時(shí)需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進(jìn)行研究,所以后來就誕生了光柵型的儀器。
先推出光柵的是MD公司,其光柵習(xí)慣上稱為單光柵。由于光純度的不足,在光柵的后面又加入了一組帶阻濾片,再把雜光過濾一遍,達(dá)到了5×10-4的雜光率,基本與純粹的濾光片系統(tǒng)一致。后來TECAN又發(fā)展出了雙光柵技術(shù),通過兩次光柵濾光,雜光率降到了10-6。后來,Thermo、BioTek和PE的部分新款儀器等都使用了類似雙光柵技術(shù)。由于激發(fā)和發(fā)射各用了一組雙光柵,此類機(jī)器又被稱為四光柵型ELX800 酶標(biāo)儀。
光柵型ELX800 酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長選擇上不再受限,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。例如,TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光柵系統(tǒng)的ELX800 酶標(biāo)儀,雜光率降到了2×10-7的新低,還實(shí)現(xiàn)了帶寬2.5~20nm連續(xù)可調(diào)。這些都是目前濾光片型ELX800 酶標(biāo)儀所不能或者較難實(shí)現(xiàn)的。
二、雜光率&波長準(zhǔn)確性
光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能ELX800 酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。
雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會(huì)直接進(jìn)入后的檢測器,所以有多少的雜光就會(huì)引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會(huì)被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個(gè)濾光系統(tǒng)的要性能指標(biāo)。
光柵的另一個(gè)重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測是依賴于物質(zhì)在某個(gè)波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實(shí)際檢測波長偏離260nm幾個(gè)nm以上的話,OD值與終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會(huì)發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長偏離過大有時(shí)就會(huì)影響到終結(jié)果的準(zhǔn)確性。
這兩個(gè)可謂是光柵甚濾光片濾光系統(tǒng)關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的基本要求
三、品牌與售后
不同品牌的儀器往往性能側(cè)重點(diǎn)有所不用。例如,PE公司由于在試劑領(lǐng)域有較深底蘊(yùn),他們的ELX800 酶標(biāo)儀在配合使用他們的TRF系列檢測試劑盒上作了多項(xiàng)優(yōu)化,因此PE的ELX800 酶標(biāo)儀普遍來說在TRF領(lǐng)域會(huì)有較多的特色功能和相對較高的性能指標(biāo)。而像TECAN,就把研發(fā)的重點(diǎn)放在了四光柵的研究方面,近年來相繼推出了第二和第三代光柵型多功能ELX800 酶標(biāo)儀,成為四光柵ELX800 酶標(biāo)儀領(lǐng)域的*。而像多功能ELX800 酶標(biāo)儀上加入比色杯、微量檢測板等功能也是TECAN從用戶角度考慮作出的技術(shù)創(chuàng)新,后來此類技術(shù)都成為了Thermo、BioTek等品牌紛紛仿效的對象。
后,無論是一臺(tái)多好的ELX800 酶標(biāo)儀,脫離了良好的售后服務(wù)體系也是難以正常運(yùn)作的。今年,各家廠商都在中國國內(nèi)設(shè)立了辦事處甚亞太區(qū)總部,有些產(chǎn)品還專門研發(fā)了中文版的軟件和說明書。這都說明了廠家對中國市場的重視。而正因?yàn)檫@種重視,無論是*還是選擇代理分銷,都會(huì)對國內(nèi)的售后服務(wù)提出各自的要求和期望,基本的就是普及儀器的應(yīng)用工程師和維修工程師網(wǎng)絡(luò)體系。
可以說,國內(nèi)的各大城市里面,基本已經(jīng)做到了部分品牌總有一個(gè)工程師在你身邊。選購之前多與工程師交流,充分了解各家的性能特長和售后情況,反復(fù)對比,總能找到自己需要的一款多功能ELX800 酶標(biāo)儀。北京龍躍生物科技發(fā)展有限公司主要經(jīng)營:艾本德5810R離心機(jī),艾本德5804R離心機(jī),艾本德5430R離心機(jī),艾本德5424R離心機(jī),艾本德5417R離心機(jī)
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