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NCI-H460 人大細胞肺癌細胞

細胞具體情況介紹：

細胞名稱                       NCI-H460 人大細胞肺癌細胞

來源                              ATCC細胞庫

種屬                              人

組織                              肺

生長特性                        半懸浮半貼壁

成瘤情況                       未成瘤

建議使用培養(yǎng)基             

龍躍細胞庫簡介：

我公司自有高品質進口來源細胞庫， 所有細胞來源為進口母細胞， 經(jīng)過永生化處理制成傳代細胞株， 保證為國內高品質傳代細胞株。

另外我們有專門的工程師負責售后維護工作， 保證您購買細胞沒有后顧之憂，  如果對細胞品質不滿意可以無條件退款或免費重新發(fā)貨，直到滿意為止。

 細胞處理方法

以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考，具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度，細胞生長狀態(tài)等具體情況，酌情處理，如需要更詳細技術指導，請及時電話或郵件聯(lián)系。

一．貼壁細胞

1. 客戶接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。
3. 顯微鏡觀察細胞，當細胞融匯80%左右（可以傳代的情況下），細胞應該在37度培養(yǎng)箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度，培養(yǎng)瓶應預留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
5. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
7. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)。

二．懸浮細胞

1. 接收到細胞，用75%的酒精消毒（建議配制75%酒精的水是滅菌過的）培養(yǎng)瓶外部。

2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張）。

3. 嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。

4. 將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒）。

5. 1000rpm,5min離心，重懸細胞。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，37℃,5%CO₂  培養(yǎng)

維修 PCR/酶標儀/所有實驗室儀器

我公司維修站目前國內有上海和北京兩個站點  （ 北京和上海可以派專人上門檢測儀器并運往維修站， 也可以發(fā)快遞我公司 ）， 免費檢查，  找到問題后報價維修， 如果報價后您覺得價格高的話可以不修（我們負責把機器原樣寄回）

實驗室儀器維修， 包括PCR， 酶標儀， 離心機，分析儀器，天平，水分計等

從事維修工作的工程師有長達20年的工作經(jīng)驗，  可勝任幾乎所有常規(guī)實驗室儀器的維修及校準等工作， 大熒光定量PCR， DNA測序儀，小到水分計都可以維修

細胞培養(yǎng)小課堂 

細胞培養(yǎng)（cell culture）是指在體外模擬體內環(huán)境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養(yǎng)都是一個*的過程，細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)?？寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術*的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。細胞培養(yǎng)技術是細胞生物學研究方法中重要和常用技術，通過細胞培養(yǎng)既可以獲得大量細胞，又可以借此研究細胞的信號轉導、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。

注意事項

編輯

（1）*次開始培養(yǎng)某種細胞時，一定要用該細胞的名稱進行檢索，可以得到關于該細胞的詳細信息，包括需要使用的培養(yǎng)基、血清、添加劑、通常的消化時間、傳代時間等。對于特定的細胞（如原代培養(yǎng)的細胞），需要查閱相關文獻來獲得更準確的培養(yǎng)方法。

（2）進入細胞間開始細胞培養(yǎng)時，必須嚴格按照下列步驟操作：

①確定所有的細胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測沒有問題，不確定的溶液和耗材請勿使用，除非特殊情況，不要借用別人的溶液。

②確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

③確定酒精燈內的酒精量，需要的話及時進行補充。

④確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。

⑤盡量不要直接傾倒溶液，除非瓶口沒有被燒壞。如果傾倒失敗，溶液粘在瓶口，請用噴過75%酒精的紙巾仔細清潔瓶口周圍（不要接觸到瓶口）后在火焰上簡單燒灼。

⑥操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時更換。

⑦實驗完畢及時收拾，保持工作區(qū)域清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（3）細胞污染的預防

①實驗用品防止污染。細胞培養(yǎng)所用試劑、耗材、器材的清洗、消毒要*，各種溶液滅菌要仔細，并在無菌實驗檢測陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔、消毒、滅菌。

②操作過程防止污染。

③穿著容易起靜電或吸附灰塵的衣物必須更換為白大褂后才能進入細胞間。

④實驗開始前需要確定戴的手套沒有問題，只要接觸過生物安全柜之外的物品，必須及時對手套進行消毒。

⑤進入細胞培養(yǎng)間后關好門，坐下來盡量少走動以免影響生物安全柜的風簾。工作開始前要先用75%酒精棉球擦手和瓶蓋。事先要嚴格檢查所用的器材、溶液和細胞，不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內，更不能隨便使用，以免造成大規(guī)模污染。

⑥細胞操作時動作要輕，必須在火焰周圍無菌區(qū)內打開瓶口，并將瓶口放在火焰周圍簡單轉動燒灼，注意不要讓火焰把塑料瓶口燒化。

⑦實驗操作時生物安全柜的隔板要盡可能放低，盡量減少談話，打噴嚏或咳嗽時不能對著工作區(qū)，以免造成不必要的污染。

⑧瓶蓋應當?shù)狗旁谶h離自己的地方，以避免瓶蓋被誤操作所污染。

⑨不要從敞開的容器口上方經(jīng)過，以避免衣服上掉落不明物體對細胞的污染。

⑩實驗操作時要注意及時更換巴斯德吸管、移液槍槍頭和移液管，切勿一根管子做到底。一旦發(fā)現(xiàn)接觸了非潔凈或者無法確定潔凈的物品必須直接丟棄。實驗完畢應及時收拾，保持實驗室清潔整齊，后用75%酒精清潔臺面。

（4）防止細胞交叉污染

①在進行多種細胞培養(yǎng)操作時，所用器具要嚴格區(qū)分，作上標記便于辨別。按順序進行操作，一次只處理一種細胞，多種細胞多種操作一起進行時易發(fā)生t昆亂。

②在進行換液或傳代操作時，粘有細胞的移液槍頭和移液管不要觸及試劑瓶瓶口，以免把細胞帶到培養(yǎng)基中污染其他細胞。

③所有細胞一旦購置，或從別處引入，或自己建立，必須及時保種凍存，一旦發(fā)生污染可重新復蘇細胞，繼續(xù)培養(yǎng)